抗菌試驗是通過模擬實際使用條件，對材料進行抗菌處理，并觀察細(xì)菌在處理前后的數(shù)量變化，以此來評估材料的抗菌效果。抗菌試驗可分為體外抗菌試驗和體內(nèi)抗菌實驗，下面跟著中科檢測小編一起來看下體外抗菌試驗。

體外抗菌試驗-殺菌檢測報告-中科檢測

體外抗菌實驗方法

1、OD值測試(適合無顏色干擾、可溶性樣品);

2、抑菌圈測試(適合活性成分可以溶出的樣品);

3、振蕩培養(yǎng)+平板涂布計數(shù)法(可用于不溶性樣品抗菌活性評價);

4、MIC測試(適合已驗證過具有抗菌活性且無顏色干擾的可溶性樣品);

5、MBC測試(適合已檢測過具有最小抑菌濃度的樣品);

如果之前沒有做過抗菌實驗，建議先做簡單的抑菌圈或者OD值評估下抗菌效果。

體外抗菌實驗樣品要求

1、抑菌圈測試

1.1塊體類-薄膜、布料、金屬塊、紙片、凝膠等

送樣量：至少3個/種菌。

制樣要求：金屬塊、凝膠類樣本須制備成統(tǒng)一大小的圓形/方形，建議制備直徑為6-10 mm圓形。布料、紙片類樣本可代為裁剪，默認(rèn)制備直徑為6 mm。

注：凝膠樣本須保證樣本在培養(yǎng)條件下(一般為37℃)不融化。

1.2液體類

送樣量：根據(jù)測試時樣本濃度而定

①若采用原液測試，則樣本量為1 mL/種菌;

②若采用稀釋后樣本測試，則須告知稀釋倍數(shù)及稀釋液，樣本量為1 mL/稀釋倍數(shù)/種菌。

1.3粉末類

送樣量：因不同樣本密度不同，無法保證每個加樣孔均能加入等量樣本，故建議樣本做分散液，按照等體積加樣(每個孔最大加樣量為0.2 mL)，能提升樣本量的一致性。需要提供質(zhì)量/體積比(選擇合適的樣本分散液)，樣本量為質(zhì)量/體積×1 mL/種菌。

如果不可使用分散液，需要預(yù)試，樣本量可聯(lián)系本公司人員確認(rèn)。

2、OD值測試

2.1塊體類-薄膜、布料、金屬塊、紙片、凝膠等

送樣量：需要提供樣本與菌液的培養(yǎng)體系。比如X g樣本/mL菌液，樣本量為4X g/種菌。

2.2液體類(要求樣本溶液無色或者淡色)

送樣量：根據(jù)測試時樣本的溶劑和濃度而定

①若溶劑具備殺菌性(如DMSO、乙醇、甲醇、DMF等)，推薦提供樣本濃度為50倍測試濃度，樣本量為0.1 mL/種菌。

舉例：測試材料的溶劑為DMSO，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為100 mg/mL濃度的樣本0.1 mL/種菌。

②若溶劑不具備殺菌性(如PBS、純水、生理鹽水等)，推薦提供樣本濃度為10倍測試濃度，樣本量為0.4 mL/種菌。

舉例：測試材料的溶劑為純水，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度的樣本0.4 mL/種菌。

注：如果提供樣本原液濃度高于推薦濃度，可按比例計算樣本量。

2.3粉末類

送樣量：需要提供樣本與菌液的培養(yǎng)體系。比如X g樣本/mL菌液，樣本量為4X g/種菌。

3、平板涂布計數(shù)測試

3.1塊體類-薄膜、金屬塊、鍍膜玻璃等(具備一定的表面積)

測試方法參考國標(biāo)GBT 31402-2015 塑料 塑料表面抗菌性能試驗方法、JCT 1054-2007 鍍膜抗菌玻璃。

送樣量：樣本量為1個/次重復(fù)/種菌

樣本尺寸：標(biāo)準(zhǔn)尺寸大小5×5cm，建議最小尺寸1×1cm

3.2液體類

送樣量：根據(jù)測試時樣本的溶劑和濃度而定

①若溶劑具備殺菌性(如DMSO、乙醇、甲醇、DMF等)，推薦提供樣本濃度為50倍測試濃度，樣本量為0.03 mL/次重復(fù)/種菌。

舉例：測試材料的溶劑為DMSO，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為100 mg/mL濃度的樣本0.03 mL/次重復(fù)/種菌。

②若溶劑不具備殺菌性(如PBS、純水、生理鹽水等)，推薦提供樣本濃度為10倍測試濃度，樣本量為0.1 mL/次重復(fù)/種菌。

舉例：測試材料的溶劑為純水，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度的樣本0.1 mL/次重復(fù)/種菌。

3.3粉末類

送樣量：需要提供樣本與菌液的培養(yǎng)體系。比如X g樣本/mL菌液，樣本量為X g/次重復(fù)/種菌。

4、MIC/MBC測試

4.1粉末/液體類(要求樣本溶液，溶解且無色或者淡色)-微孔板法

送樣量：根據(jù)測試時樣本的溶劑和初始工作濃度而定

①若溶劑具備殺菌性(如DMSO、乙醇、甲醇、DMF等)，推薦提供樣本濃度為50倍測試濃度，樣本量為0.03 mL/種菌。

舉例：測試材料的溶劑為DMSO，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為100 mg/mL濃度的樣本0.03 mL/種菌。

②若溶劑不具備殺菌性(如PBS、純水、生理鹽水等)，推薦提供樣本濃度為10倍測試濃度，樣本量為0.1 mL/種菌。

舉例：測試材料的溶劑為純水，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度的樣本0.1 mL/種菌。

注：如果提供樣本原液濃度高于推薦濃度，可按比例計算樣本量。

如果樣本為粉末，可按照濃度和所需體積計算樣本量(<10 mg者，需稱量并標(biāo)記清楚，避免樣本量較少情況下再反復(fù)稱量造成損耗)。

4.2粉末/液體類(樣本顏色較重)-平板法

送樣量：根據(jù)測試時樣本工作濃度和濃度個數(shù)而定。比如工作濃度為X g/mL(或?M)，測試n個濃度，樣本量為60X*n g(或10X ?M的液體樣本6*n mL)

4.3液體類(樣本屬于分散液或制備成分散液，且呈無色或者淡色)-試管法

送樣量：根據(jù)測試時樣本工作濃度而定

①若分散劑具備殺菌性(如DMSO、乙醇、甲醇、DMF等)，推薦提供樣本濃度為50倍測試濃度，樣本量為2 mL/種菌。

舉例：測試材料的分散劑為DMSO，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為100 mg/mL濃度的樣本2 mL/種菌。

②若分散劑不具備殺菌性(如PBS、純水、生理鹽水等)，推薦提供樣本濃度為10倍測試濃度，樣本量為10 mL/種菌。

舉例：測試材料的分散劑為純水，測試濃度為2 mg/mL。則需提供樣本為20 mg/mL濃度的樣本10 mL/種菌。

4.4粉末類(直接加樣)-試管法

送樣量：根據(jù)測試時樣本的工作濃度而定。比如工作濃度為X mg/mL(g/mL)，則樣品量為30X mg(g)/種菌。

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