土壤微生物檢測(cè)針對(duì)土壤微生物，以往的研究大多聚焦于土壤微生物組成和多樣性的空間分異，而對(duì)土壤微生物組成和多樣性在時(shí)間尺度上的動(dòng)態(tài)變化研究較少。人們觀(guān)測(cè)到很多微生物介導(dǎo)的生物地球化學(xué)過(guò)程均顯示出季節(jié)性的動(dòng)態(tài)變化，如溫室氣體排放通量。然而，這些過(guò)程與微生物群落組成和多樣性動(dòng)態(tài)變化的關(guān)系尚不清楚。在為數(shù)不多的一些有關(guān)土壤微生物群落動(dòng)態(tài)變化研究中，人們利用時(shí)間序列分析和高通量測(cè)序技術(shù)發(fā)現(xiàn)，一些生態(tài)系統(tǒng)中土壤微生物群落組成和多樣性也表現(xiàn)出明顯的動(dòng)態(tài)變化，動(dòng)態(tài)變化的模式因不同生態(tài)系統(tǒng)而有差異。揭示這種動(dòng)態(tài)變化的規(guī)律及其驅(qū)動(dòng)機(jī)制，可以使我們深入認(rèn)識(shí)微生物群落的演替規(guī)律及其對(duì)生態(tài)系統(tǒng)功能的影響，以揭示群落穩(wěn)定性與生物多樣性的關(guān)系，預(yù)測(cè)微生物群落對(duì)氣候變化、土地利用等擾動(dòng)的響應(yīng)。為了闡明這些科學(xué)問(wèn)題，需要在不同生態(tài)系統(tǒng)中對(duì)土壤微生物類(lèi)群和基因組進(jìn)行長(zhǎng)期、定點(diǎn)、動(dòng)態(tài)的監(jiān)測(cè);同時(shí)結(jié)合其他生態(tài)過(guò)程監(jiān)測(cè)，如生物地球化學(xué)過(guò)程、植被演替等，以便獲得系統(tǒng)的監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)。
zui近十余年來(lái)，上開(kāi)展了一些微生物組計(jì)劃，這些計(jì)劃主要研究人體腸道微生物，如美國(guó)人體微生物組計(jì)劃，加拿大微生物組研究項(xiàng)目，以及歐盟和中國(guó)的MetaHIT項(xiàng)目等，尚缺乏專(zhuān)門(mén)針對(duì)土壤微生物組的研究計(jì)劃。當(dāng)前進(jìn)行的微生物組計(jì)劃沒(méi)有能夠很好地合作，研究方法也不統(tǒng)一，雖然各研究計(jì)劃都產(chǎn)生了大量數(shù)據(jù)，但很難對(duì)這些數(shù)據(jù)進(jìn)行整合。如利用16SrRNA基因鑒定微生物群落組成時(shí)，由于擴(kuò)增16SrRNA基因的引物不同，zui終獲得的數(shù)據(jù)差異很大。另外，由于生物信息處理序列數(shù)據(jù)時(shí)選擇的方法不同，估算微生物物種數(shù)量時(shí)可以差2–3個(gè)數(shù)量級(jí)。因此，對(duì)微生物多樣性監(jiān)測(cè)工作而言，標(biāo)準(zhǔn)化的研究流程和研究方法對(duì)于數(shù)據(jù)的可比性非常重要。然而，每種研究方法均有其局限性，過(guò)分追求標(biāo)準(zhǔn)化也不利于創(chuàng)新。如用常用的16SrRNA引物515F/806R調(diào)查土壤微生物組成時(shí)，可能會(huì)漏掉一些*的菌群。在第三代單分子測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用中，在對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)進(jìn)行處理時(shí)，進(jìn)行OTUs（可操作分類(lèi)單元）分類(lèi)是關(guān)鍵的一步，目前雖然有很多計(jì)算方法，但沒(méi)有一種方法適用于所有的情況，所以要根據(jù)研究問(wèn)題、數(shù)據(jù)情況和計(jì)算能力來(lái)選擇。
對(duì)于土壤微生物檢測(cè)多樣性監(jiān)測(cè)的系統(tǒng)研究工作很少，可以借鑒的經(jīng)驗(yàn)和標(biāo)準(zhǔn)方法不多。美國(guó)科學(xué)家發(fā)起的地球微生物組計(jì)劃，目的是為了在尺度上收集各種生態(tài)系統(tǒng)中微生物群落組成和分布的數(shù)據(jù)，分析微生物群落的分布、多樣性及形成機(jī)制。項(xiàng)目組織者也建議了一些標(biāo)準(zhǔn)化的方法，涉及實(shí)驗(yàn)室技術(shù)和數(shù)據(jù)處理流程等，如土壤基因組DNA提取建議用MoBio公司生產(chǎn)的PowerSoilDNAisolationkit。該試劑盒采用的方法能有效地去除土壤中的PCR抑制物，可重復(fù)性強(qiáng)，但價(jià)格較高。PCR擴(kuò)增16SrRNA基因建議用515F/806R,利用Illumina公司的Miseq或Hiseq平臺(tái)測(cè)序;18SrRNA基因的擴(kuò)增推薦用Euk_1391f和EukBr，擴(kuò)增子序列的處理推薦用QIIME平臺(tái)。該項(xiàng)目還對(duì)如何提供與樣品對(duì)應(yīng)的宏數(shù)據(jù)也進(jìn)行了一定的規(guī)范。但是，該項(xiàng)目沒(méi)有對(duì)野外取樣過(guò)程和土壤微生物動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)的方法提出建議。這種人為設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)方法和流程還存在一些問(wèn)題。筆者認(rèn)為，在土壤微生物多樣性監(jiān)測(cè)方法的選擇上，要根據(jù)不同的研究目的制定出多套研究方案，同時(shí)及時(shí)采用新的技術(shù)手段，鼓勵(lì)探索新的方法。
土壤微生物檢測(cè)多樣性監(jiān)測(cè)將產(chǎn)生大量數(shù)據(jù)，加上已經(jīng)發(fā)表的數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)的管理、查詢(xún)和挖掘亟需建立大數(shù)據(jù)平臺(tái)，然而至今尚沒(méi)有系統(tǒng)的土壤微生物多樣性的數(shù)據(jù)集和專(zhuān)業(yè)數(shù)據(jù)庫(kù)。如何實(shí)現(xiàn)微生物多樣性監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的共享，涉及到很多具體問(wèn)題需要解決，如數(shù)據(jù)整合和共享方式、數(shù)據(jù)庫(kù)運(yùn)行支撐體系、知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)問(wèn)題等等。
另一方面，為了研究一個(gè)物種的生理、生化特征及工業(yè)應(yīng)用，分離純化功能微生物是非常重要的。至今，環(huán)境中的大多數(shù)微生物物種還不能在實(shí)驗(yàn)室中被分離培養(yǎng)出來(lái)，這是當(dāng)前土壤微生物多樣性研究中存在的一個(gè)大問(wèn)題，因此，傳統(tǒng)分離培養(yǎng)方法的改進(jìn)也是土壤微生物多樣性研究的重要課題。利用監(jiān)測(cè)獲得的數(shù)據(jù)可以得到物種的分類(lèi)信息，把要分離的物種與已分離菌種的生長(zhǎng)條件進(jìn)行比較，通過(guò)查詢(xún)已知培養(yǎng)基數(shù)據(jù)庫(kù)（如KOMODO），可以為分離新菌種推薦培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。而一株重要功能微生物的獲得，可以對(duì)人類(lèi)社會(huì)產(chǎn)生巨大的影響。
綜上所述，建議在國(guó)家層面上頂層設(shè)計(jì)相關(guān)重大項(xiàng)目，圍繞土壤微生物多樣性監(jiān)測(cè)、微生物資源挖掘、分離培養(yǎng)新技術(shù)和微生物資源大數(shù)據(jù)共享平臺(tái)建設(shè)等方面重點(diǎn)開(kāi)展研究。